Multiplex qPCR Probe Premix
Ucing No: HCB5051A
TaqMan multiplex qPCR Master Mix (Dye Based) nyaéta pre-solusi pikeun 2 × real-time kuantitatif amplifikasi PCR dicirikeun ku sensitipitas tinggi na spésifisitas, nu bulao dina warna, sarta miboga éfék tambahan sampel.Produk ieu mangrupikeun réagen campuran 2 × Campur anu ngamungkinkeun dugi ka opat réaksi PCR kuantitatif fluoresensi dina hiji sumur réaksi.Produk ieu ngandung metode antibodi anu dirobih sacara genetik pikeun énzim Taq mimiti panas, ningkatkeun sensitipitas sareng spésifisitas amplifikasi.Dina waktu nu sarua, produk ieu geus deeply dioptimalkeun panyangga multi-réaksi, nu bisa ngaronjatkeun efisiensi Gedekeun réaksi jeung ngamajukeun Gedekeun efektip témplat-konsentrasi low.Produk ieu tiasa dianggo pikeun genotyping sareng analisis kuantitatif multiplex.
Spésifikasi
| Panas Mimitian | Diwangun-di mimiti panas |
| Métode deteksi | Deteksi Primer-usik |
| Métode PCR | qPCR |
| Polimérase | Taq DNA polimérase |
| Jenis sampel | DNA |
Kaayaan Panyimpenan
Produkna dikirim ku és garing sareng tiasa disimpen dina -25 ~ -15 ℃ salami 2 taun.
parentah
1. RéaksiSistim
| Komponén | Volume (μL) | Konsentrasi ahir |
| 2 × TaqMan multiplex qPCR Master Campur | 12.5 | 1 × |
| Campuran Primer (10 μmol/L) a | × | 0,1 - 0,5 μmol / L |
| Campuran usik (10 μmol/L)b | × | 50 - 250 nmol/L |
| pewarna rujukan Rox | 0.5 | 1 × |
| Témplat DNA/cDNA | 1-10 | - |
| ddH2O | nepi ka 25 | - |
Catetan:Campur tuntas saméméh pamakéan pikeun nyegah gelembung kaleuleuwihan ti oyag kuat.
a.Konsentrasi Primer: Campuran Primer ngandung sababaraha pasang primers, biasana unggal primer dina konsentrasi ahir 0,2 μmol/L sarta ogé bisa disaluyukeun antara 0,1 jeung 0,5 μmol/L sakumaha luyu.
b.Konsentrasi usik: Campuran usik ngandung sababaraha panyilidikan kalayan sinyal fluoresensi anu béda, sareng konsentrasi unggal usik tiasa disaluyukeun antara 50 sareng 250 nmol / L dumasar kana kaayaan khusus.
1.Rujukan pewarna Rox: Dipaké dina alat amplifikasi PCR Real Time sapertos Applied Biosystems pikeun ngabenerkeun kasalahan sinyal fluoresensi anu dihasilkeun antara sumur;produk ieu teu ngandung rujukan ngalelep Rox.Cas # 10200 dianjurkeun lamun diperlukeun.
2.éncér citakan: qPCR kacida sénsitip, sarta eta disarankeun pikeun éncér template pikeun pamakéan.Lamun citakan mangrupa solusi stock cDNA, volume template teu kudu ngaleuwihan 1/10 tina total volume.
3.Sistem réaksi: 25μL, 30μL atanapi 50 μL disarankeun pikeun mastikeun efektivitas sareng kaulangan tina amplifikasi gén target.
4.Persiapan Sistim: Mangga nyiapkeun dina bangku super bersih, sarta nganggo tips na tabung réaksi tanpa résidu nuclease;Disarankeun make tips kalawan cartridges filter.Hindarkeun kontaminasi silang sareng kontaminasi aerosol.
2.Program réaksi
| Lengkah siklus | Temp. | Waktos | Siklus |
| Awal-denaturasi | 95 ℃ | 5 mnt | 1 |
| Denaturasi | 95 ℃ | 15 detik | 45 |
| Annealing / Extension | 60 ℃ | 30 detik |
Catetan:
1.Annealing / Extension: Suhu jeung waktu bisa appropriately disaluyukeun nurutkeun nilai Tm primér dirancang.
2.Akuisisi sinyal fluoresensi: Waktos akuisisi sinyal fluoresensi anu dipikabutuh pikeun instrumen deteksi qPCR anu béda-béda béda, mangga atur dumasar kana wates waktos minimum.Waktu sababaraha instrumen umum diatur kieu:
20 detik: Applied Biosystems 7700, 7900HT, 7500 Fast
31 detik: Applied Biosystems 7300
32 detik: Applied Biosystems 7500
Catetan
Punten nganggo PPE anu diperyogikeun, sapertos jas lab sareng sarung tangan, pikeun mastikeun kasehatan sareng kasalametan anjeun!
