2×HiF Taq tambah Master Campur
Cat No: HCR2014B
HIF Taq plus Master Mix (With Dye) mangrupikeun solusi 2×premixed siap dianggo anu ngandung Plus HIF DNA Polymerase, dNTP, sareng panyangga anu dioptimalkeun.Dua antibodi monoklonal dina suhu kamar nu ngahambat aktivitas polimérase jeung aktivitas 3′→5′exonuclease ditambahkeun kana master mix pikeun gampang tur kacida husus Hot Start PCR.Faktor extension ditambahkeun kana campuran master pikeun masihan énzim kapasitas amplifikasi fragmen panjang, panjang amplifikasi bisa nepi ka 13 kb, énzim boga aktivitas polimérase DNA 5′→3′ jeung 3′→5′. Aktivitas exonuclease, kasatiaanna nyaéta 83 kali tina Taq DNA polymerase, nyaéta 9 kali tina polimérase DNA biasa.Éta cocog pikeun amplifikasi témplat kompléks, produk amplifikasi mangrupikeun tungtung anu blunt.
2×HIF Taq tambah Master Campur (Kalayan Dye) boga kaunggulan gancang jeung gampang, sensitipitas tinggi, spésifisitas kuat, stabilitas alus, jeung sajabana, sistem réaksi ukur perlu nambahkeun primers na template, sarta bisa amplified ku dua- protokol léngkah, nyederhanakeun léngkah ékspérimén sareng ngahémat waktos.Produk ieu ngandung pewarna indikator éléktroforésis, sareng produk PCR tiasa dianggo langsung pikeun éléktroforésis.Sajaba ti éta, produk ogé ngandung agén pelindung husus, ku kituna master campuran bisa ngajaga aktivitas stabil sanggeus ngulang freeze-ngalembereh.
Kaayaan Panyimpenan
Produk kudu disimpen dina -25 ~ -15 ℃ salila 1 taun.
spésifikasi
| spésifikasi produk | Master Campur |
| Konsentrasi | 2× |
| Panas Mimitian | Diwangun-di Hot Mimitian |
| Overhang | Blunt |
| Laju réaksi | Gancang |
| Ukuran (Produk Akhir) | Nepi ka 13 kb |
| Kaayaan keur transportasi | És garing |
| Jenis produk | Premixes PCR kasatiaan tinggi |
parentah
1.Sistem Réaksi PCR
| Komponén | Volume (μL) |
| DNA Citakan | Cocog |
| Primer hareup (10 μmol/L) | 2.5 |
| Primer Balik (10 μmol/L) | 2.5 |
| 2×HIF Taq tambah Master Campur | 25 |
| ddH2O | nepi ka 50 |
2.Disarankeun pamakéan témplat béda
| Jenis template | Amplify fragmen tina 1kb ka 10 kb |
| DNA génomik | 50ng-200 ng |
| Plasmid atanapi DNA Viral | 10pg-20ng |
| cDNA | 1-2,5 µL (Ulah ngaleuwihan 10% tina volume réaksi PCR ahir) |
3.Protokol Amplifikasi
1) Protokol Dua-Lengkah (témplat pajeulitna)
| Lengkah siklus | Temp. | Waktos | Siklus |
| Denaturasi awal | 98 ℃ | 3 mnt | 1 |
| Denaturasi | 98 ℃ | 10 detik | 30-35 |
| Ékstensi | 68 ℃ | 30 detik/kb | |
| extension final | 72 ℃ | 5 mnt | 1 |
2) Protokol Tilu-Lengkah (protokol biasa)
| Lengkah siklus | Temp. | Waktos | Siklus |
| Denaturasi awal | 98 ℃ | 3 mnt | 1 |
| Denaturasi | 98 ℃ | 10 detik | 30-35 |
| Anil | 60 ℃ | 20 detik | |
| Ékstensi | 72 ℃ | 30 detik/kb | |
| extension final | 72 ℃ | 5 mnt | 1 |
3) Protokol Gradién Annealing (témplat pajeulitna)
| Lengkah siklus | Suhu | Waktos | Siklus |
| Denaturasi awal | 98 ℃ | 3 mnt | 1 |
| Denaturasi | 98 ℃ | 10 detik | 15 (1 ℃ réduksi per siklus) |
| anil gradién | 70-55 ℃ | 20 detik | |
| Ékstensi | 72 ℃ | 30 detik/kb | |
| Denaturasi | 98 ℃ | 10 detik |
20 |
| Anil | 55 ℃ | 20 detik | |
| Ékstensi | 72 ℃ | 30 detik/kb | |
| extension final | 72 ℃ | 5 mnt | 1 |
Fitur dina protokol amplifikasi anu béda
| Protocol | Dua-Lengkah | Tilu-léngkah | anil gradién |
| Spésifikasi. | gancang | sedeng | lalaunan |
| Spésifikasi | luhur | sedeng | luhur |
| ngahasilkeun PCR | sedeng | luhur | sedeng |
| Laju deteksi | luhur | sedeng | luhur |
Catetan
Punten nganggo PPE anu diperyogikeun, jas lab sareng sarung tangan sapertos kitu, pikeun mastikeun kasehatan sareng kasalametan anjeun!
