2×PCR Super Mix (kalayan Dye)
2× PCR Master Mix ngandung Taq DNA Polymerase, dNTPs, sareng komponén anu diperyogikeun PCR.Campuran Master stabil salami 3 bulan dina 4 ℃ kalayan stabilisator khusus kami.Solusi pra-campuran dioptimalkeun pikeun PCR konvensional sareng siap dianggo ku nambihan template DNA sareng primer.Produk PCR tiasa langsung dimuat pikeun éléktroforésis nganggo pewarna biru bromofénol anu tos dimuat.Produk anu diamplifikasi ngandung tonjolan 3'-dA sareng tiasa gampang diklon kana vektor T.2×PCR Master Mix nyederhanakeun prosedur PCR sareng ngirangan kontaminasi.
Kaayaan Panyimpenan
Produk kudu disimpen dina -25 ℃ ~ -15 ℃ salila 2 taun.
spésifikasi
| Kasatiaan (vs.Taq) | 1 × |
| Panas Mimitian | No |
| Overhang | 3 '-A |
| Polimérase | Taq DNA Polimérase |
| Format Réaksi | SuperMix atanapi Master Campur |
| Laju réaksi | Standar |
| Jenis produk | Campuran Master PCR (2x) |
parentah
1.Sistem Réaksi
| Komponén | Jilid(μL) |
| DNA template | Cocog |
| Primer 1 (10 μmol/L) | 2 |
| Primer 2 (10 μmol/L) | 2 |
| 2 × PCR Master Campur | 25 |
| ddH2O | nepi ka 50 |
2.Protokol Amplifikasi
| Léngkah siklus | Suhu (°C) | Waktos | Siklus |
| Denaturasi awal | 94 | 5 mnt | 1 |
| Denaturasi | 94 | 30 detik | 35 |
| Anil | 50-60 | 30 detik | |
| Ékstensi | 72 | 30-60 detik/kb | |
| extension final | 72 | 10 mnt | 1 |
Catetan:
1) pamakéan template: 50-200ng DNA génomik;0,1-10 ng DNA plasmid.
2) Mg2+konsentrasi: Produk ieu ngandung 3mM of MgCl2, cocog pikeun paling réaksi PCR.
3) Suhu Annealing: Mangga tingal nilai Tm teoritis primers.Suhu annealing tiasa disetel ka 2-5 ℃ langkung handap tina nilai téoritis primer.
4) waktos extension: Pikeun idéntifikasi molekular, 30 detik / kb disarankeun.Pikeun kloning gen, disarankeun 60 detik/kb.
Catetan
1.Produk PCR sareng 2 × PCR Master Mix henteu cocog pikeun éléktroforésis gél polyacrylamide.
2.Pikeun kasalametan sareng kasehatan anjeun, mangga paké jas lab sareng sarung tangan kanggo operasi.
3.Hal ieu dipaké pikeun pamakéan panalungtikan wungkul!
