Rnase A
Ribonuclease A(RNaseA) nyaéta polipéptida untaian tunggal anu ngandung 4 beungkeut disulfida kalayan beurat molekul kira-kira 13,7 kDa.RNase A mangrupa éndoribonuklease anu sacara husus nguraikeun RNA untaian tunggal dina résidu C jeung U.Sacara husus, pembelahan ngakuan beungkeut fosfodiester dibentuk ku 5'-ribosa nukléotida jeung gugus fosfat dina 3'-ribosa nukléotida pirimidin padeukeutna, ku kituna fosfat 2,3'-siklik dihidrolisis jadi 3 pakait. 'nukleosida fosfat (contona, pG-pG-pC-pA-pG dipisahkeun ku RNase A pikeun ngahasilkeun pG-pG-pCp sareng A-PG).RNase A nyaéta anu paling aktip dina meulah RNA untai tunggal.Konsentrasi kerja anu disarankeun nyaéta 1-100 μG/mL, cocog sareng sababaraha sistem réaksi.Konsentrasi uyah rendah (0-100 mM NaCl) tiasa dianggo pikeun motong RNA untaian tunggal, RNA untaian ganda, sareng ranté RNA anu dibentuk ku hibridisasi RNA-DNA.
Sanajan kitu, dina konsentrasi uyah luhur (≥0.3 M), RNase A ngan husus cleaves RNA untaian tunggal.
RNase A paling ilahar dipaké pikeun miceun RNA salila persiapan DNA plasmid atawa DNA génomik.Naha DNase aktip atanapi henteu salami prosés persiapan tiasa gampang mangaruhan réaksina.Metodeu tradisional ngagolakkeun dina mandi cai tiasa dianggo pikeun nganonaktipkeun kagiatan DNase.Produk ieu henteu ngandung DNase sareng protease, sareng henteu peryogi perlakuan panas sateuacan dianggo.Salaku tambahan, produk ieu ogé tiasa dianggo dina percobaan biologi molekular sapertos analisis panyalindungan RNase sareng analisis sekuen RNA.
Kaayaan neundeun
Produk kudu disimpen dina -25 ℃ ~ - 15 ℃ salila 2 taun.
spésifikasi
| Penampilan | Bubuk |
| kuantitas | 100 mg / 1 g |
| Jenis produk | RNase A |
parentah
Ieu salah sahiji metodeu umum pikeun nyiapkeun solusi panyimpenan RNase A.Ogé bisa disiapkeunku métode séjénna numutkeun métode tradisional di laboratorium atawa rujukan literatur (sapertoslangsung leyur dina 10 mM Tris-HCl, pH 7,5 atawa solusi Tris-NaCl)
1. Anggo 10 mM natrium asétat (pH 5.2) pikeun nyiapkeun 10 mg/mL larutan panyimpenan RNase A.
2. Pemanasan dina 100 ℃ salila 15 mnt.
3. Tiiskeun ka suhu kamar, tambahkeun 1/10 volume 1 M Tris-HCl (pH 7,4), saluyukeun pH na ka 7,4 (pikeuncontona, tambahkeun 500 ml larutan panyimpen RNase 10 mg/ml 1 M Tris-HCl, pH7.4).
4. Sub-rangkep dina -20 ℃ pikeun neundeun beku, nu bisa stabil nepi ka 2 taun.
[Catetan]:
Nalika ngagolakkeun solusi RNaseA dina kaayaan nétral, présipitasi RNase bakal ngabentuk;Kulub éta dina pH anu langkung handap, sareng upami aya présipitasi, éta tiasa dititénan, anu tiasa disababkeun ku ayana pangotor protéin.Lamun sedimen kapanggih sanggeus ngagolak, najis bisa dihapus ku centrifugation-speed tinggi (13000rpm), lajeng sub-dipak pikeun neundeun katirisan.
Catetan
Punten nganggo PPE anu diperyogikeun, sapertos jas lab sareng sarung tangan, pikeun mastikeun kasehatan sareng kasalametan anjeun.
