Hiji Lengkah RT-qPCR SYBR Green Premix
Ucing No: HCB5140A
Hiji Lengkah RT-qPCR Syber Green Premix nyaéta pikeun kuantitas fluoresensi dumasar kana SYBR Green I ngalelep.Ngagunakeun primers gén-spésifik, transkripsi sabalikna sarta réaksi qPCR réngsé dina hiji tube, ngaleungitkeun kabutuhan operasi cap-bukaan jeung pipetting diulang, greatly ngaronjatkeun efisiensi assay sarta ngurangan résiko kontaminasi.Pikeun conto RNA, kit ngagunakeun Reverse Transcriptase tahan panas pikeun sintésis cDNA efisien sareng HotStart Taq DNA Polymerase pikeun amplifikasi kuantitatif.Dina sistem panyangga anu dioptimalkeun, sensitipitas kit tiasa saluhur 0,1 pg pikeun target anu dikedalkeun pisan sareng saluhur 1 pg pikeun target anu dikedalkeun sacara moderat.Kit ieu cocog pikeun amplifikasi sareng kuantifikasi sampel DNA.Éta ngamungkinkeun deteksi sénsitip sareng kuantifikasi asam nukléat tina sababaraha conto tutuwuhan sareng sasatoan, sél sareng mikroorganisme.
Komponén
| No | Ngaran | Jilid | Jilid |
| 1 | Panyangga canggih | 250 μL | 2 × 1,25 ml |
| 2 | Canggih Énzim Campuran | 20 μL | 200 μL |
| 3 | RNase Gratis H2O | 250 μL | 2 × 1,25 ml |
Kaayaan Panyimpenan
Produk ieu kudu disimpen dina -25 ~ -15 ℃ jauh ti lampu pikeun 1 taun.
parentah
1.Konfigurasi sistem réaksid
| Komponén | Volume (μL) | Volume (μL) | Konsentrasi ahir |
| Panyangga canggih | 12.5 | 25 | 1 × |
| Campuran Énzim canggih | 1 | 2 | - |
| Primer Maju (10 μmol/L)a | 0.5 | 1 | 0,2 μmol / L |
| Primer Balik (10 μmol/L)a | 0.5 | 1 | 0,2 μmol / L |
| RNA Tamplateb | X | X | - |
| RNase Gratis H2Oc | nepi ka 25 | nepi ka 50 | - |
Catetan:
1) a.TKonsentrasi primer ahirna nyaéta 0,2 μmol/L, anu ogé bisa disaluyukeun antara 0,1 jeung 1μmol/L sasuai.
2) b.Réagen pisan sénsitip, kalayan Total RNA dina kisaran 1pg-1μg, sareng uji sampel manusa nunjukkeun input optimal 1 pg-100 ng, ngadalikeun nilai Ct sadayana dina kisaran 15-30 anu pas.
3) c.Disarankeun ngagunakeun 20μL atanapi 50μL pikeun mastikeun validitas sareng reproducibility tina amplifikasi gén target.
4) d.Mangga nyiapkeun dina bangku ultra-bersih sarta ngagunakeun tips nuclease bébas résidu na tabung réaksi;tips kalawan cartridges filter disarankeun.Hindarkeun kontaminasi silang sareng kontaminasi aerosol.
2.Program réaksi
| Lengkah siklus | Temp. | Waktos | Siklus |
| Transkripsi sabalikna | 50 ℃a | 6 mnt | 1 |
| Denaturasi awal | 95 ℃ | 5 mnt | 1 |
| Réaksi amplifikasi | 95 ℃ | 15 detik | 40 |
| 60 ℃b | 30 detik | ||
| Tahap kurva lebur | Instrumén Defaults | 1 | |
Catetan:
1) a.Suhu transkripsi sabalikna tiasa dipilih antara 50-55 ° C dumasar kana kabutuhan ékspérimén.Pikeun sampel DNA, prosés transkripsi sabalikna bisa dileungitkeun.
2) b.Dina kasus husus suhu annealing / extension bisa disaluyukeun nurutkeun nilai Tm primer, 60 ° C dianjurkeun.
Catetan
1. Produk ieu kanggo panalungtikan wungkul.
2. Mangga beroperasi kalawan jas lab jeung sarung disposable, pikeun kaamanan Anjeun.
