Hiji Lengkah Gancang RT-qPCR Probe Premix-UNG
Ucing No: HCR5143A
One Step RT-qPCR Probe Kit (FOR FAST) mangrupikeun kit deteksi gancang RT-qPCR dumasar usik cocog pikeun PCR kuantitatif tunggal-plex atanapi multiplex nganggo RNA salaku citakan (sapertos virus RNA).Produk ieu nganggo generasi anyar Taq DNA Polymerase anu dirobih antibodi sareng hiji-léngkah khusus Reverse Transcriptase, kalayan panyangga anu dioptimalkeun pikeun amplifikasi gancang, anu gaduh laju amplifikasi anu langkung gancang, efisiensi amplifikasi sareng spésifisitas anu langkung luhur.Éta ngadukung amplifikasi saimbang dina plex tunggal sareng multipleks sampel konsentrasi rendah sareng luhur dina waktos anu singget.
Komponén
1. 5×RT-qPCR panyangga (U+)
2. Campuran énzim (U+)
Catetan:
a.5×RT-qPCR panyangga (U+)kaasup dNTP jeung Mg2+;
b.Campuran énzim (U+) ngawengku reverse transcriptase, Hot Start Taq DNA polymerase, RNase inhibitor and UDG;
c.Paké tips RNase-Free, tabung EP, jsb.
Saméméh dipaké, tuntas campur panyangga 5×RT-qPCR (U+).Upami aya présipitasi saatos ngalebur, ngantosan panyangga mulang ka suhu kamar, campur sareng larut, teras dianggo sacara normal.
Kaayaan Panyimpenan
Produkna dikirim ku és garing sareng tiasa disimpen dina -25 ~ -15 ℃ salami 1 taun.
parentah
1. Réaksi Sistim
| Komponén | Volume (20 μL réaksi) |
| 2 ×RT-qPCR panyangga | 4 μL |
| Campuran énzim (U+) | 0,8 μL |
| Primer Maju | 0,1 ~ 1,0 μM |
| Primer Reverse | 0,1 ~ 1,0 μM |
| TaqMan Probe | 0,05 ~ 0,25μM |
| Citakan | X μL |
| Cai Tanpa RNase | nepi ka 25 μL |
Catetan: Volume réaksi nyaéta 10-50μL.
2. Protokol Ngabuburit (Standard)
| Siklus lengkah | Temp. | Waktos | Siklus |
| Transkripsi Ngabalikeun | 55 ℃ | 10 mnt | 1 |
| Denaturasi awal | 95 ℃ | 30 detik | 1 |
| Denaturasi | 95 ℃ | 10 detik | 45 |
| Annealing / Extension | 60 ℃ | 30 detik |
| Protokol Ngabuburit (Gancang) Siklus lengkah |
Temp. |
Waktos |
Siklus |
| Transkripsi Ngabalikeun | 55 ℃ | 5 mnt | 1 |
| Denaturasi awal | 95 ℃ | 5 s | 1 |
| Denaturasi | 95 ℃ | 3 s | 43 |
| Annealing / Extension | 60 ℃ | 10 s |
Catetan:
a.Suhu transkripsi sabalikna nyaéta antara 50 ℃ nepi ka 60 ℃, ngaronjatna suhu mantuan pikeun ngagedékeun struktur kompléks jeung citakan eusi CG tinggi;
b.Suhu annealing optimal kedah disaluyukeun dumasar kana nilai Tm tina primer, sareng pilih waktos anu paling pondok pikeun ngumpulkeun sinyal fluoresensi dumasar kana alat PCR Real Time.
Catetan
Punten nganggo PPE anu diperyogikeun, sapertos jas lab sareng sarung tangan, pikeun mastikeun kasehatan sareng kasalametan anjeun!
