Multiplex Hiji Lengkah RT-qPCR Premix
Katerangan
Ucing No: HCR5141A
Multiplex One Step RT-qPCR Premix mangrupikeun Kit PCR kuantitatif multiplex dumasar kana RNA salaku citakan.Dina percobaan, transkripsi sabalikna sareng PCR kuantitatif dilakukeun dina tabung réaksi anu sami, nyederhanakeun operasi ékspérimén sareng ngirangan résiko kontaminasi.Desain unik tina panyangga jeung énzim campuran bisa dipaké dina hiji-hambalan sistem lyophilized.Kit ngagunakeun Reverse Transcriptase tahan panas pikeun sintésis cDNA untaian munggaran anu efisien ngagunakeun Hotstart Taq DNA Polymerase pikeun amplifikasi kuantitatif.Éta ngandung panyangga réaksi anu dioptimalkeun, campuran énzim sareng sajabana, sareng faktor-faktor anu sacara efektif ngahambat amplifikasi PCR non-spésifik sareng ningkatkeun efisiensi amplifikasi sababaraha réaksi qPCR ditambahkeun, ngamungkinkeun sababaraha amplifikasi kuantitatif fluoresensi bari mastikeun efisiensi amplifikasi primer.
Komponén
Ngaran |
1. Lyo-panyangga |
2. Campuran Lyo-Énzim |
3. Lyo panyalindungan |
Kaayaan transportasiion
A: Lyo-panyangga jeung protectant: -25 ~ -15 ℃, hirup rak téh 1 taun.
B: Campuran Lyo-énzim, 2-8 ℃, umur rak 6 bulan.
Parentah pikeun operasi
1. Sistem Réaksi (Candak 25μL salaku conto)
Komponén | Volume (μL) | Konsentrasi ahir |
Lyo-panyangga | 6 | 1* |
Campuran Lyo-Énzim | 1 | - |
Lyo-Protectant | 8 | - |
Campuran Primer (10μM) | 1 | 0.1-1uM |
Probe Campuran (10μM) | 0.5 | 0,05-0,5uM |
Citakan RNA | 5 | - |
DEPC H2O | Nepi ka 25 | - |
2. Dioptimalkeun Ngabuburit Protocol
1) Standar Ngabuburit Protocol
Tahap réaksi | Suhu | Waktos | Siklus | |
1 | Transkripsi sabalikna | 50°Ca | 10 mnt | 1 |
2 | Denaturasi awal | 95°C | 5 mnt | 1 |
3 | Réaksi amplifikasi | 95°C | 15 detik | 45 siklus |
60°Cb | 30 detikc |
2) Protokol Ngabuburit Gancang
| Tahap réaksi | Suhu | Waktos | Siklus |
1 | Transkripsi sabalikna | 50°Ca | 2 mnt | 1 |
2 | Denaturasi awal | 95°C | 2 detik | 1 |
3 | Réaksi amplifikasi | 95°C | 1 detik |
45 siklus |
60°Cb | 13 detikc |
Catetan:
a) Ngabalikeun transkripsi: Suhu bisa milih 42°C atawa 50°C pikeun 10-15 menit.
b) Réaksi amplifikasi: Suhu disaluyukeun nurutkeun nilai Tm tina primers dirancang.
c)Fluoresensi sinyal akuisisi: Mangga atur prosedur ékspérimén numutkeun sarat tinamanual alat.
Émbaran teknis / spésifikasi
Panas Mimitian | Diwangun-di mimiti panas |
Métode deteksi | Deteksi Primer-usik |
Métode PCR | Hiji hambalan RT-qPCR |
Jenis sampel | RNA |
Catetan
1. Produk ieu kanggo panalungtikan wungkul.
2. Punten nganggo PPE anu diperyogikeun, jas lab sapertos sareng sarung tangan, pikeun mastikeun kasehatan sareng kasalametan anjeun!