DNase I (Rnase Bébas)(5u/ul)
Ucing No: HC4007A
DNase I (Deoxyribonuclease I) nyaéta endodeoxyribonuclease nu bisa nyerna DNA untai tunggal atawa ganda.Ieu mikawanoh sarta megatkeun beungkeut fosfodiester pikeun ngahasilkeun monodeoxynucleotides atawa oligodeoxynucleotides untai tunggal atawa ganda kalawan gugus fosfat di 5'-terminal jeung hidroksil di 3'-terminal.Aktivitas DNase I gumantung kana Ca2+sarta bisa diaktipkeun ku ion logam divalent kayaning Bungbulang2+jeung Zn2+.5 mM Ca2+ngajaga énzim tina hidrolisis.Dina ayana Mg2+, énzim bisa sacara acak mikawanoh sarta meulah situs mana wae dina untaian DNA.Dina ayana Mn2+, untaian ganda DNA bisa sakaligus dipikawanoh tur dibeulah di situs ampir sarua pikeun ngabentuk fragmen DNA tungtung datar atawa fragmen DNA tungtung caket kalawan 1-2 nukléotida nonjol.
Komponén
| Ngaran | 0.1KU | 1KU | 5 KU | 50 KU |
| DNase I, RNase-gratis | 20 μL | 200 μL | 1 ml | 10 ml |
| 10×DNase I panyangga | 1 ml | 1 ml | 5 × 1 ml | 5 × 10 ml |
Kaayaan neundeun
-25 ℃ ~ -15 ℃ pikeun neundeun;Angkot handapeun és bungkus.
parentah
1. Nyiapkeun leyuran réaksi dina tabung RNase bébas nurutkeun babandingan didaptarkeun di handap:
| Komponén | Jilid |
| RNA | X µg |
| 10 × DNase I panyangga | 1 μL |
| DNase I, RNase-gratis (5U/μL) | 1 U per µg RNA① |
| ddH2O | Nepi ka 10μL |
Catetan: ①Itung volume DNase I anu perlu ditambahkeun dumasar kana jumlah RNA.
2. 37 ℃ salila 15 menit;
3. Tambahkeun 0.5M EDTA kana konsentrasi ahir 2.5mM ~ 5mM, sarta panas dina 65 ℃ salila 10 menit pikeun ngeureunkeun réaksina.Sampel tiasa langsung dianggo pikeun réaksi salajengna sapertos transkripsi sabaliknapercobaan.
Harti Unit
Hiji unit dihartikeun salaku jumlah énzim nu sagemblengna bakal nguraikeun 1µg pBR322DNA dina 10 menit dina 37 ℃.
Kontrol kualitas
RNase:5U DNase I kalayan 1.6µg MS2 RNA salami 4 jam dina suhu 37 ℃ henteu ngahasilkeun degradasi sapertosditangtukeun ku éléktroforésis gél agarose.
Catetan
1. Mangga nyiapkeun 0.5MEDTA ku sorangan.
2. Anggo 1U DNase I per µg RNA.Nanging, upami RNA kirang ti 1µg, mangga nganggo 1U DNase I.
3. Mangga nempatkeun énzim dina és salila operasi.
