2×PCR Master Mix (tanpa Pewarna)
PCR Master Mix mangrupikeun solusi PCR premixed konvensional anu siap dianggo, kalebet Taq DNA Polymerase, dNTP campuran MgCl2 sareng panyangga anu dioptimalkeun.Salila réaksina, ngan ukur primer sareng citakan tiasa nambihan pikeun amplifikasi, anu nyederhanakeun léngkah-léngkah operasi ékspérimén.Produk ieu ngandung stabilisator anu saé sareng tiasa disimpen salami 3 bulan dina suhu 4 ℃.Produk PCR gaduh tonjolan 3′-dA sareng tiasa gampang diklon kana vektor T.
Kaayaan Panyimpenan
Produk kudu disimpen dina -25 ℃ ~ -15 ℃ salila dua taun.
spésifikasi
| Kasatiaan (vs.Taq) | 1 × |
| Panas Mimitian | No |
| Overhang | 3'-A |
| Polimérase | Taq DNA Polimérase |
| Format Réaksi | SuperMix atanapi Master Campur |
| Laju réaksi | Standar |
| Jenis produk | PCR Master Campuran (2×) |
parentah
1.Sistem Réaksi
| Komponén | Ukuran (μL) |
| DNA template | Cocog |
| Primer 1 (10 μmol/L) | 2 |
| Primer 2 (10 μmol/L) | 2 |
| PCR Master Campur | 25 |
| ddH2O | Ka 50 |
2.Protokol Amplifikasi
| Léngkah siklus | Suhu (°C) | Waktos | Siklus |
| Pra-denaturasi | 94 ℃ | 5 mnt | 1 |
| Denaturasi | 94 ℃ | 30 detik | 35 |
| Anil | 50-60 ℃ | 30 detik | |
| Ékstensi | 72 ℃ | 30-60 detik/kb | |
| Extension Final | 72 ℃ | 10 mnt | 1 |
Catetan:
1) pamakéan template: 50-200 ng DNA génomik;0,1-10 ng plasmid DNA.
2) Mg2+konsentrasi: Produk ieu ngandung 3 mM MgCl2 cocog pikeun paling réaksi PCR.
3) Suhu Annealing: Mangga tingal nilai Tm teoritis Primer.Suhu annealing tiasa disetel ka 2-5 ℃ langkung handap tina nilai téoritis primer.
4) waktos ekstensi: Pikeun idéntifikasi molekular, 30 detik / kb disarankeun.Pikeun kloning gén, 60detik / kb disarankeun.
Catetan
1.Pikeun kasalametan sareng kasehatan anjeun, mangga paké jas lab sareng sarung tangan kanggo operasi.
2.Pikeun pamakéan panalungtikan wungkul!
