Kit Ekstraksi DNA/RNA Virus
Kit ieu cocog pikeun ékstraksi gancang DNA / RNA viral-purity luhur tina sampel kayaning swab nasopharyngeal, swab lingkungan, supernatants kultur sél, sarta supernatants homogenate jaringan.Kit ieu dumasar kana téknologi purifikasi mémbran silika anu ngaleungitkeun kabutuhan pikeun ngagunakeun pelarut organik fénol / kloroform atanapi présipitasi alkohol anu nyéépkeun waktos pikeun nimba DNA / RNA virus anu kualitasna luhur.Asam nukléat diala bébas tina najis sarta siap dipaké dina percobaan hilir kayaning transkripsi sabalikna, PCR, RT-PCR, real-time PCR, next-generation sequencing (NGS), sarta Northern blot.
Kaayaan neundeun
Nyimpen dina 15 ~ 25 ℃, sarta angkot dina suhu kamar
Komponén
Komponén | 100RXNS |
Panyangga VL | 50 ml |
Panyangga RW | 120 ml |
ddH2 O tanpa RNase | 6 ml |
Kolom RNA FastPure | 100 |
Tabung Koléksi (2ml) | 100 |
Tabung Koléksi bébas RNase (1 .5ml) | 100 |
Panyangga VL:Nyayogikeun lingkungan pikeun lisis sareng ngariung.
Panyangga RW:Ngaleungitkeun protéin sésa-sésa sareng pangotor sanés.
ddH2O bébas RNase:Élute DNA/RNA tina mémbran dina kolom spin.
Kolom RNA FastPure:Khususna nyerep DNA/RNA.
Tabung Koléksi 2 ml:Kumpulkeun filtrate.
Tabung Koléksi RNase bébas 1,5 ml:Kumpulkeun DNA/RNA.
Aplikasi
Swab nasofaring, swab lingkungan, supernatan kultur sel, dan supernatan homogenat jaringan.
Disiapkeun diri Materials
Tip pipette bébas RNase, 1,5 ml tabung centrifuge bébas RNase, centrifuge, mixer vortex, sarta pipettes.
Prosés ékspérimén
Laksanakeun sadaya léngkah di handap ieu dina kabinet biosafety.
1. Tambahkeun 200 μl sampel kana tabung centrifuge bébas RNase (nyieun ku PBS atawa 0,9% NaCl bisi sampel teu cukup), tambahkeun 500 μl panyangga VL, campur ogé ku vortexing pikeun 15 - 30 detik, sarta centrifuge. sakeudeung pikeun ngumpulkeun campuran di handap tabung.
2. Teundeun FastPure RNA Kolom dina tabung Koléksi 2 ml.Mindahkeun campuran tina Lengkah 1 ka FastPure RNA Columns, centrifuge dina 12.000 rpm (13.400 × g) salila 1 mnt, sarta piceun filtrate nu.
3. Tambahkeun 600 μl Buffer RW kana FastPure RNA Columns, centrifuge dina 12.000 rpm (13.400 × g) salila 30 detik, sarta piceun filtrate nu.
4. Malikan deui Lengkah 3.
5. Centrifuge kolom kosong dina 12.000 rpm (13.400 × g) salila 2 mnt.
6. Sacara saksama mindahkeun FastPure RNA Columns kana Tabung Koléksi RNase-gratis anyar 1,5 ml (disadiakeun dina kit), sareng tambahkeun 30 - 50 μl ddH2O bébas RNase ka tengah mémbran tanpa ngarampa kolom.Ngidinan pikeun nangtung dina suhu kamar salami 1 mnt sareng centrifuge dina 12.000 rpm (13.400 × g) salami 1 mnt.
7. Piceun FastPure RNA Kolom.DNA/RNA bisa dipaké langsung pikeun tés saterusna, atawa disimpen dina -30~ -15°C pikeun période pondok atawa -85 ~-65°C pikeun période nu leuwih panjang.
Catetan
Pikeun pamakéan panalungtikan wungkul.Henteu kanggo dianggo dina prosedur diagnostik.
1. Equilibrate sampel ka suhu kamar sateuacanna.
2. Virus kacida tepa.Punten pastikeun sadaya pancegahan kaamanan anu diperyogikeun dilaksanakeun sateuacan ékspérimén.
3. Hindarkeun beku terus-terusan sarta thawing sampel, sabab ieu bisa ngakibatkeun degradasi atawa ngurangan ngahasilkeun DNA / RNA viral sasari.
4. alat-alat timer disiapkeun ngawengku RNase bébas pipette tips, 1,5 ml RNase tabung centrifuge bébas, centrifuge, mixer vortex, sarta pipettes.
5. Lamun maké kit, maké jas lab, sarung latex disposable, sarta masker disposable sarta pamakéan consumables bébas RNase pikeun ngaleutikan résiko kontaminasi RNase.
6. Nedunan sagala léngkah dina suhu kamar iwal mun disebutkeun dieusian.
Mékanisme & Workflow