BspQI
BspQI bisa recombinantly dinyatakeun dina E. coli nu bisa mikawanoh situs husus sarta dihasilkeun dina
BspQI, endonuklease restriksi endonuklease IIs, diturunkeun tina galur E. coli rékombinan anu mawa gen BspQI anu diklon sareng dimodifikasi tina Bacillus sphaericus.Bisa mikawanoh situs husus, sarta urutan pangakuan sarta situs beulahan nyaéta kieu:
5' · · · ·GCTCTTC(N) · · · · · · · · · · · · · 3'
3' · · · · CGAGAAG(NNNN) · · · · 5'
Fitur produk
1. aktivitas High, nyerna gancang;
2. aktivitas béntang Low, mastikeun motong akurat kawas "scalpel";
3. Tanpa BSA jeung sato-asal bébas;
Sensitipitas métilasi
Dmetilasi:Teu Sensitip;
Dcm métilasi:Teu Sensitip;
Métilasi CpG:Teu Sensitip;
Kaayaan neundeun
produk kudu shipped ≤ 0 ℃;Simpen dina -25 ~ - 15 ℃ kaayaan.
Panyangga gudang
20mM Tris-HCl, 0.1mM EDTA, 500mM KCl, 1.0mM dithiothreitol, 500 µg/ml Rekombinan Albumin, 0. 1% Trition X- 100 jeung 50% gliserol (pH 7.0 @ 25°C).
Harti Unit
Hiji unit dihartikeun salaku jumlah énzim diperlukeun pikeun nyerna 1µg DNA kontrol internal dina 1 jam dina 50 ° C dina volume réaksi total 50 µL.
Kontrol kualitas
Uji Kamurnian Protéin (SDS-PAGE):The purity of BspQI éta ≥95% ditangtukeun ku analisis SDS-PAGE.
RNase:10U of BspQI kalawan 1.6μg MS2 RNA salila 4 jam dina 50 ℃ ngahasilkeun euweuh degradasi sakumaha ditangtukeun ku éléktroforésis gél agarose.
Kagiatan DNase Non-Spésifik:10U of BspQI kalawan 1μg λ DNA dina 50 ℃ salila 16 jam, dibandingkeun jeung 50 ℃ salila 1 jam, ngahasilkeun euweuh kaleuwihan DNA sakumaha ditangtukeun ku éléktroforésis gél agarose.
Ligation sareng Recutting:Saatos nyerna 1 μg λDNA sareng 10U BspQI, fragmen DNA tiasa diikat ku ligase DNA T4 dina suhu 16ºC.Jeung fragmen ligated ieu bisa recut kalawan BspQI.
E. coli DNA: E. coli 16s rDNA-spésifik TaqMan deteksi qPCR némbongkeun yén résidu génom E.coli ≤ 0.1pg / ul.
Résidu protéin host:≤ 50 ppm
Baktéri Éndotoksin: LAL-test, nurutkeun Cina Pharmacopoeia IV 2020 édisi, gél wates test metoda, aturan umum (1143).Eusi éndotoksin baktéri kudu ≤10 EU/mg.
Sistim réaksi jeung kaayaan
| Komponén | Jilid |
| BspQ I (10 U/μL) | 1 μL |
| DNA | 1 ugg |
| 10 x BspQ kuring panyangga | 5 μl |
| d H2O | Nepi ka 50 μL |
Kaayaan réaksi: 50 ℃, 1~ 16 jam.
Inactivation panas: 80 ° C salila 20 mnt.
Sistim réaksi jeung kaayaan dianjurkeun bisa nyadiakeun éfék nyerna énzim rélatif alus, nu keur rujukan wungkul, mangga tingal hasil eksperimen pikeun detil.
aplikasi produk
Pangwatesan nyerna endonuclease, Kloning gancang.
Catetan
1. Volume énzim ≤ 1/10 volume réaksi.
2. Aktivitas béntang bisa lumangsung nalika konsentrasi gliserol leuwih ti 5%.
3. Aktivitas cleavage bisa lumangsung nalika substrat handap rasio dianjurkeun.
